Цитологія і генетика 2011, том 45, № 6, 53-60
Cytology and Genetics 2011, том 45, № 6, 373-378, doi: https://www.doi.org/10.3103/S0095452711060053

Индукция экспрессии гена репаративного энзима О6-метилгуанин-ДНК метилтрансферазы под влиянием цитокина EMAP II в клетках человека in vitro

Лыло В.В., Мацевич Л.Л., Коцаренко Е.В., Бабенко Л.А., Корнелюк, А.И., Сухорада Е.М., Лукаш Л.Л.

  • Институт молекулярной биологии и генетики НАН Украины, Киев
  • Киевский национальный университет им. Т. Шевченко

Цель работы — определить влияние рекомбинантного цитокина EMAP II (эндотелиальный и моноцитактивирующий полипептид II) на уровень экспрессии гена MGMT, кодирующего репаративный энзим О6­метилгуанин­ДНК метилтрансферазу (MGMT), в культурах клеток человека. Исследование влияния EMAP II на пролиферацию клеток проводили с использованием стандартного МТТ­теста. Белок MGMT в клеточном экстракте идентифицировали с помощью Вестерн­блот анализа. Использовались клеточные линии: А102 (фибробласты), ПК­1 (стромальные клетки пуповинной крови) и 4BL6 (клетки, полученные из периферической крови). В серии экспериментов показано, что цитокин EMAP II вызывает индукцию экспрессии MGMT в клетках человека исследованных линий. При высоких концентрациях этого цитокина наблюдалось снижение количества клеток. Установлено, что присутствие цитокина EMAP II в бессывороточной культуральной среде приводит к возрастанию уровня экспрессии репаративного энзима MGMT в клетках человека in vitro.

Мета роботи – визначити вплив рекомбінантного цитокіну EMAP II (ендотеліальний та моноцитактивуючий поліпептид II) на рівень експресії гена MGMT, що кодує репаративний ензим О6-метилгуанін-ДНК метилтрансферазу (MGMT), в культурах клітин людини. Дослідження впливу EMAP II на виживання і проліферацію клітин проводили з використанням стандартного МТТ-тесту. Білок MGMT у клітинному екстракті ідентифікували за допомогою Вестерн-блот аналізу. Використовувались клітинні лінії: А102 (фібробласти), ПК-1 (стромальні клітини пуповинної крові) і 4BL6 (клітини, отримані з периферійної крові). В серії експериментів показано, що цитокін EMAP II спричиняє індукцію експресії MGMT в клітинах людини досліджуваних нами ліній. При високих концентраціях цього цитокіну спостерігалось зниження кількості клітин. Встановлено, що присутність цитокіну EMAP II в безсироватковому культуральному середовищі призводить до зростання рівня експресії репаративного ензиму MGMT в клітинах людини in vitro.

Ключові слова:

Цитологія і генетика
2011, том 45, № 6, 53-60

Current Issue
Cytology and Genetics
2011, том 45, № 6, 373-378,
doi: 10.3103/S0095452711060053

Повний текст та додаткові матеріали

У вільному доступі: PDF  

Цитована література