Цитологія і генетика 2017, том 51, № 5, 85-88
Cytology and Genetics 2017, том 51, № 5, 401–412, doi: https://www.doi.org/10.3103/S0095452717050085

Transformation and evaluation of different transgenic lines for Glyphosate Tolerance and Cane borer resistance genes in sugarcane (Saccharum officinarum L.)

Qamar Z., Riaz S., Nasir I.A., Ali Q., Husnain T.

Center of Excellence in Molecular Biology, University of the Punjab, Lahore, Pakistan

РЕЗЮМЕ. Целью исследования было обеспечить системную экспрессию генов GTG и Cry1Ac под контролем двух различных конститутивных промоторов, а именно Ubiquitin­1 и 35S у различных линий сахарного тростника. Амплификацию GTG и Cry1Ac из потенциально трансгенных растений осуществляли с помощью специфических праймеров. Ка­чественное сравнение экспрессии генов GTG и Cry1Ac под контролем двух разных промоторов осуществляли на основе дот­блот анализа и экспресспробы. Появление относительно темных цветных пятен в тесте дот­блот и темных полос в экспресс-тесте на убихитин по сравнению со светлыми полосами промотора CaMV35S подтвердило высокие уровни экспрессии двух генов под контролем убихитинового промотора. При сравнении количест­венных характеристик экспрессии генов максимальная оптическая плотность (OD) при 450 нм УФ­облучении выявлена для GTG (3.7 OD) и Cry1Ac (3 OD) под убихитиновим промотором, а для GTG (1.6 OD) и Cry1Ac (2.5 OD) под промотором CaMV 35S. Эти результаты являются свидетельством более высокой экспрессии двух генов у сахарного тростника под промотором Ubiquitin-1, чем под промотором CaMV 35S. Настоящее исследование дает направление стабильной и высокой экспрессии трансгенов под убихитиновим промотором, что может быть использовано для сахарного тростника и других однодольных.

РЕЗЕМЮ. Метою дослідження було забезпечити системну експресію двох генів (GTG та Cry1Ac) під контролем двох різних конститутивних промоторів, а саме Ubiquitin­1 і 35S у різних ліній цукрової тростини. Ампліфікацію GTG і Cry1Ac з потенційно трансгенних рослин здійснювали за допомогою специфічних праймерів. Якісне порівняння експресії генів GTG і Cry1Ac під контролем двох різних промоторів здійснювали на основі дот­блот аналізу та експрес­проби. Поява відносно темних кольорових плям в тесті дот­блот та темних смуг в експрес­тесті на убіхітин порівняно зі світлими смугами промотора CaMV35S підтвердила високі рівні експресії двох генів під контролем убіхітинового промотора. При порівнянні кількісних характеристик експресії генів максимальну оптичну щільність (OD) при 450 нм УФ­опроміненні встановлено для GTG (3.7 OD) та Cry1Ac (3 OD) під убіхітиновим промотором, а для GTG (1.6 OD) та Cry1Ac (2.5 OD) під CaMV 35S­промотором. Ці результати є свідченням більш високої експресії двох генів у цукрової тростини під промотором Ubiquitin-1, ніж під промотором CaMV 35S. Дане дослідження дає напрямок стабільної та високої експресії трансгенів під убіхітиновим промотором, що може бути використано для цукрової тростини та інших однодольних.

Ключові слова: Saccharum officinarum, GTG, Cry1Ac gene, CaMV 35S promoter, Ubiquitin promoter

Цитологія і генетика
2017, том 51, № 5, 85-88

Current Issue
Cytology and Genetics
2017, том 51, № 5, 401–412,
doi: 10.3103/S0095452717050085

Повний текст та додаткові матеріали

Цитована література