Цитологія і генетика 2011, том 45, № 1, 3-10
Cytology and Genetics 2011, том 45, № 1, 1-6, doi: https://www.doi.org/10.3103/S0095452711010026

Получение трансгенных линий ячменя, продуцирующих лактоферрин человека, с использованием мутантного альфа-тубулина в качестве селективного маркерного гена

Танасиенко И.В., Емец А.И., Пирко Я.В., Корховой В.И., Абумхади Н., Блюм Я.Б.

  • Институт пищевой биотехнологии и геномики НАН Украины, Киев
  • AgroBioInstitute, Sofia, Bulgaria
Метод биолистической трансформации был использован для генетического усовершенствования трех коммерческих сортов ячменя отечественной селекции (Оксамытовый, Водограй и Гетьман). Для трансформации использовали конструкцию pHLFTuBA, содержащую ген интереса, ген человеческого лактоферрина (hLF) под контролем глютелинового В-1 (GluB-1) промотора риса. В качестве селективного маркерного гена использовали ген мутантного a-тубулина, обеспечивающего устойчивость к трифлюралину (гербицид динитроанилинового ряда). Для установления селективной концентрации трифлюралина был проведен скрининг его разных концентраций в диапазоне от 0,1 до 30 мкМ. После 2–3 месяцев селекции на 10 мкМ трифлюралина были получены две трансгенные линии растений ячменя сорта Оксамытовый и каллусная линия сорта Гетьман. Для подтверждения стабильной интеграции гена hLF был проведен ПЦР-анализ листьев растений-регенерантов после их адаптации в грунте. В обеих линиях ячменя был амплифицирован фрагмент гена hLF размером 734 п.н.

Ключові слова:

Цитологія і генетика
2011, том 45, № 1, 3-10

Current Issue
Cytology and Genetics
2011, том 45, № 1, 1-6,
doi: 10.3103/S0095452711010026

Повний текст та додаткові матеріали

У вільному доступі: PDF  

Цитована література