Генетическая трансформация растений льна-долгунца (Linum usitatissimum L.) химерным геном GFP-TUA6 для визуализации микротрубочек

Шиша Е.Н., Корховой В.И., Баер Г.Я., Гузенко Е.В., Лемеш В.А., Картель Н.А., Емец А.И., Блюм Я.Б.

Оригінальна работа 

Представлены результаты по агробактериальной трансформации ряда сортов льна-долгунца, районированных в Республике Беларусь и Украине, плазмидой, которая содержит химерный ген GFP-TUA6 и селективный ген nptII. При проведении экспериментов учитывали факторы, влияющие на эффективность трансформации, а именно оптическую плотность, время инокуляции эксплантов с агробактерией и условия кокультивирования. На селективной среде, содержащей канамицин в концентрации 100 мг/л, отобраны линии, трансгенная природа которых подтверждена с помощью ПЦР-анализа. Экспрессию химерного гена GFP-TUA6 изучали с помощью конфокальной лазерной микроскопии. Полученные нами линии в дальнейшем могут быть использованы для углубленного изучения роли микротрубочек в формировании волокон, а также механической устойчивости к полеганию у льна-долгунца.

Представлено результати з агробактеріальної трансформації ряду сортів льону-довгунця, районованих на територіях Білорусі та України, за допомогою плазміди, що містила химерний ген GFP-TUA6 та селективний маркерний ген nptII, який несе стійкість до канаміцину. При проведенні трансформації враховували фактори, що впливають на ефективність трансформації, а саме оптичну щільність, оптимальний проміжок часу інокуляції експлантів з агробактерією та умови кокультивування. На селективному середовищі, що містило канаміцин в концентрації 100 мг/л, відібрано лінії, трансгенна природа яких була підтверджена за допомогою ПЛР-аналізу. Експресію химерного гена GFP-TUA6 детектовано за допомогою лазерної скануючої конфокальної мікроскопії. Отримані в ході наших досліджень лінії в подальшому можуть бути використані для поглибленого вивчення ролі мікротрубочок в процесах формування волокна, а також механічної стійкості до полягання у льону-довгунця.

Цитологія і генетика 2013, том 47, № 2, C. 3-11

• ГУ «Институт пищевой биотехнологии и геномики Национальной академии наук Украины», Киев
• ГНУ «Институт генетики и цитологии НАН Беларуси», Минск

E-mail: elenashysha mail.ru

Шиша Е.Н., Корховой В.И., Баер Г.Я., Гузенко Е.В., Лемеш В.А., Картель Н.А., Емец А.И., Блюм Я.Б. Генетическая трансформация растений льна-долгунца (Linum usitatissimum L.) химерным геном GFP-TUA6 для визуализации микротрубочек, Цитологія і генетика., 2013, том 47, № 2, C. 3-11.

В "Cytology and Genetics". Якщо тільки можливо, цитуйте статтю по нашій англомовній версії:
E. N. Shysha, V. I. Korhovyu, G. Ya. Bayer, E. V. Guzenko, V. A. Lemesh, N. A. Kartel’, A. I. Yemets, Ya. B. Blume Genetic transformation of flax (Linum usaitatissimum L.) with the chimeric GFP-TUA6 gene for the visualization of microtubules, Cytol Genet., 2013, vol. 47, no. 2, pp. 63-69
DOI: 10.3103/S0095452713020096