РЕЗЮМЕ. Orinus intermedius – це багаторічна ендемічна рослина, що росте лише на південно-східному Цинхай-Тибетському нагір’ї. Вона має особливо цінні екологічні та генетичні властивості, а деякі її морфологічні характеристики присутні також у O. thoroldii та O. kokonoricus. У цьому дослідженні ми провели секвенування та формування її повного геному хлоропласту (cp) за допомогою платформи Illumina HiSeq4000 з подальшим обговоренням її характеристик та філогенетичної позиції цього виду рослин. Результати демонструють, що повний геном хлоропласту O. intermedius складається з 134 296 п.н. з високим вмістом AT – 61,6 %. Структура геному хлоропласту стандартної чотиристоронньої форми, яка містить пару інвертованого повтору (ІП, 21 024 п.н. кожен), відділену зонами невеликої унікальної копії (SSC, 12 478 п.н.) та великої унікальної копії (LSC, 79,770 п.н.). Він кодує 136 генів, включаючи 81 протеїн-кодуючий ген, 44 гени тРНК та вісім генів рРНК. Більшість цих генів зустрічаються як унікальна копія. Більше того, серед анотованих генів з геному хлоропласту O. intermedius немає генів, що містять інтрони. Філогенетичний аналіз на основі 41 послідовностей повного геному хлоропласту показав, що O. intermedius є сестринською філогенетичною гілкою гілки виду Eragrostis з Chloridoideae.
Ключові слова: Poaceae; Orinus intermedius; повний геном хлоропласту; філогенетичний аналіз; Цинхай-Тибетське нагір’я
Повний текст та додаткові матеріали
Цитована література
1. Gray, J.C., Genetic manipulation of the chloroplast genome, Biotechnology, 1989, vol. 12, no. 14, pp. 317–335.
2. Howe, C.J., Barbrook, A.C., Koumandou, V.L., Nisbet, R.E., and Symington, H.A., Evolution of the chloroplast genome, Philos. Trans. R. Soc. Lond., B. Biol. Sci., 2003, vol. 358, no. 1429, pp. 99–107. https://doi.org/10.1098/rstb.2002.1176
3. Jansen, R.K., Cai, Z.Q., Raubeson, L.A., Daniell, H., Depamphilis, C.W., Leebens-Mack, J., Müller, K.F., Guisinger-Bellian, M., Haberle, R.C., Hansen, A.K., Chumley, T.W., Lee, S.B., Peery, R., McNeal, J.R., Kuehl, J.V., and Boore, J.L., Analysis of 81 genes from 64 plastid genomes resolves relationships in angiosperms and identifies genome-scale evolutionary patterns, Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A., 2007, vol. 104, no. 49, pp. 19369–19374. https://doi.org/10.1073/pnas.0709121104
4. Odintsova, M.S. and Yurina, N.P., Chloroplast genomics of land plants and algae, Biotechnol. Appl. Photosyn. Protein: Biochips, Biosensors, Biodevices, 2006, pp. 57–72.
5. Li, W.M., Ruf, S., and Bock, R., Constancy of organellar genome copy numbers during leaf development and senescence in higher plants, Mol. Genet. Genom., 2006, vol. 275, no. 2, pp. 185–192. https://doi.org/10.1007/s00438-005-0075-7
6. McNeal, J.R., Leebens-Mack, J.H., Arumuganathan, K., Kuehl, J.V., Boore, J.L., and DePamphilis, C.W., Using partial genomic fosmid libraries for sequencing complete organellar genomes, Biotechniques, 2006, vol. 41, no. 1, pp. 69–73. https://doi.org/10.2144/000112202
7. Sugiura, M., The genomics of land plant chloroplasts: gene content and alteration of genomic information by RNA editing, Photosynth. Res., 2001, vol. 70, no. 1, pp. 107–118.
8. Su, X., Liu, Y.P., Wu, G.L., Luo, W.C., and Liu, J.Q., A taxonomic revision of Orinus (Poaceae) with a new species, O. intermedius, from the Qinghai-Tibet Plateau, Novon, 2017, vol. 25, no. 2, pp. 206–213. https://doi.org/10.3417/2015047
9. Su, X., Wu, G.L., Li, L.L., and Liu, J.Q., Species delimitation in plants using the Qinghai-Tibetan Plateau endemic Orinus (Poaceae: Tridentinae) as an example, Ann. Bot., 2015, vol. 116, no. 1, pp. 35–48. https://doi.org/10.1093/aob/mcv062
10. Doyle, J.J. and Doyle, J.L., Isolation of plant DNA from fresh tissue, Focus, 1990, vol. 12, no. 1, pp. 13–15.
11. Bolger, A.M., Lohse, M., and Usadel, B., Trimmomatic: a flexible trimmer for Illumina sequence data, Bioinformatics, 2014, vol. 30, no. 15, pp. 2114–2120. https://doi.org/10.1093/bioinformatics/btu170
12. Zerbino, D.R. and Birney, E., Velvet: algorithms for de novoshort read assembly using de Bruijn graphs, Genome Res., 2008, vol. 18, no. 5, pp. 821–829. https://doi.org/10.1101/gr.074492.107
13. Lohse, M., Drechsel, O., Kahlau, S., and Bock, R., Organellar genome DRAW—a suite of tools for generating physical maps of plastid and mitochondrial genomes and visualizing expression data sets, Nucleic Acids Res., 2013, vol. 41, pp. W575–W581. https://doi.org/10.1093/nar/gkt289
14. Katoh, K. and Standley, D.M., MAFFT multiple sequence alignment software version7: improvements in performance and usability, Mol. Biol. Evol., 2013, vol. 30, no. 4, pp. 772–780. https://doi.org/10.1093/molbev/mst010
15. Swofford, D.L., PAUP*: Phylogenetic Analysis Using Parsimony (* and other methods), version 4, Sunderland, MA: Sinauer Associates, 2002.
16. Stamatakis, A., RAxML version 8: a tool for phylogenetic analysis and post-analysis of large phylogenies, Bioinformatics, 2014, vol. 30, no. 9, pp. 1312–1313. https://doi.org/10.1093/bioinformatics/btu033
17. Liu, Y., Su, X., Tao, T.L., and Chen, L.K., Characterization of the complete chloroplast genome sequence of Littledalea racemosa Keng (Poaceae: Bromeae), Conserv. Genet. Resour., 2018, vol. 10, no. 3, pp. 343–346.
18. Yang, M., Zhang, X.W., Liu, G.M., Yin, Y.X., Chen, K.F., Yun, Q.Z., Zhao, D.J., Al-Mssallem, I.S., and Yu, J., The complete chloroplast genome sequence of date palm (Phoenix dactylifera L.), PLoS One, 2010, vol. 5, no. 9. e12762. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0012762
19. Li, X.W., Gao, H.H., Wang, Y.T., Song, J.Y., Henry, R., Wu, H.Z., Hu, Z.G., Yao, H., Luo, H.M., Luo, K., Pan, H.L., and Chen, S.L., Complete chloroplast genome sequence of Magnolia grandiflora and comparative analysis with related species, Sci. China Life Sci., 2013, vol. 56, no. 2, pp. 189–198.
20. Li, X.J., Yang, Z.Y., Huang, Y.L., and Ji, Y.H., Complete chloroplast genome of the medicinal plant Paris polyphylla var. chinensis (Melanthiaceae), J. Trop. Subtrop. Bot., 2015, vol. 23, no. 6, pp. 601–613.
21. Li, X.W., Hu, Z.G., Lin, X.H., Li, Q., Gao, H.H., Luo, G.A., and Chen, S.L., High-throughput pyrosequencing of the complete chloroplast genome of Magnolia officinalis and its application in species identification, Yao Xue Xue Bao, 2012, vol. 47, no. 1, pp. 124–130.