РЕЗЮМЕ. Streptomyces albus J1074 – одна из самых популярных платформ гетерологической экспресии актино-бактерийных биосинтетических генных кластеров (BGCs). Прилагают значительные усилия к тому, чтобы понять все физиологические и генетические аспекты вторичного метаболизма J1074; это должно максимизировать экспресию гетерологичных BGCs. Следует отметить, что геном J1074 содержит много (>20) BGCs, экспресия которых сильно варьирует. Идентификация факторов, лимитирующих проявление BGCs в J1074 может помочь улучшить этот штамм для нужд гетерологической экспресии. В качестве первого шага в этом направлении нами описано вторичный метаболом 1074 в жидкой бреде SG2, которая, как было показано ранее, поддерживает продукцию противобактерийных и противогрибковых соединений. Мы сравниваем метаболомные данные с транскриптомом J1074 в SG2 на 60 час выращивания. Результаты наших исследований обсуждены в контексте текущего понимания метаболомных и транскриптомных данных для штамма J1074.
Streptomyces albus J1074 – одна із найпопулярніших платформ для гетерологічної експресії актинобактерійних біосинтетичних генних кластерів (BGCs). Докладають значних зусиль, аби зрозуміти всі фізіологічні та генетичні аспекти вторинного метаболізму J1074, з тим щоб максимізувати експресію гетерологічних BGCs. Слід відзначити, що геном J1074 містить багато (>20) BGCs, експресія яких значно варіює. Отже, ідентифікація факторів, що обмежують вияв BGCs в J1074 можуть допомогти покращити цей штам для потреб гетерологічної експресії. Як перший крок в цьому керунку нами описано вторинний метаболом 1074 в рідкому середовищі SG2, що, як показано нами раніше, підтримує продукцію протибактерійних і протигрибкових сполук. Ми порівнюємо метаболомні дані з транскриптомом J1074 в SG2 на 60 год росту. Результати наших досліджень обговорено в контексті поточного розуміння метаболомних і транскриптомних даних для штаму J1074.
Ключові слова: Streptomyces albus J1074, вторичный метаболизм, RNA-seq
Streptomyces albus J1074, вторинний метаболізм, RNA-seq
Повний текст та додаткові матеріали
У вільному доступі: PDFЦитована література
1. Zaburannyi, N., Rabyk, M., Ostash, B., Fedorenko, V., and Luzhetskyy A., Insights into naturally minimised Streptomyces albus J1074 genome, BMC Genomics, 2014, vol. 15, pp. 97–108. https://doi.org/10.1186/1471-2164-15-97
2. Bilyk, O. and Luzhetskyy, A., Host organism: Streptomyces, in Industrial Biotechnology, Wittmann, Ch. and Liao, J.C., Eds., Weinheim, Germany: Wiley-VCH Verlag GmbH & Co KGaA, 2017, chapter 13, pp. 487–506. https://doi.org/10.1002/9783527807796.ch13 3. Brown, E.D. and Wright, G.D., Antibacterial drug discovery in the resistance era, Nature, 2016, vol. 529, no. 7586, pp. 336–343. https://doi.org/10.1038/nature17042
4. Katz, M., Hover, B.M., and Brady, S.F., Culture-independent discovery of natural products from soil metagenomes, J. Ind. Microbiol. Biotechnol., 2016, vol. 43, no. 2–3, pp. 129–141. https://doi.org/10.1007/s10295-015-1706-6
5. Olano C., García, I., González, A., Rodriguez, M., Rozas, D., Rubio, J., Sánchez-Hidalgo, M., Braña, A.F., Méndez, C., and Salas, J.A., Activation and identification of five clusters for secondary metabolites in Streptomyces albus J1074, Microb. Biotechnol., 2014, vol. 7, no. 3, pp. 242–256. https://doi.org/10.1111/1751-7915.12116
6. Ahmed, Y., Rebets, Y., Tokovenko, B., Brötz, E., and Luzhetskyy, A., Identification of butenolide regulatory system controlling secondary metabolism in Streptomyces albus J1074, Sci. Rep., 2017, vol. 7, no. 1, pp. 9784. https://doi.org/10.1038/s41598-017-10316-y
7. Xu, F., Nazari, B., Moon, K., Bushin, L.B., and Seyedsayamdost, M.R., Discovery of a cryptic antifungal compound from Streptomyces albus J1074 using high-throughput elicitor screens, J. Am. Chem. Soc., 2017, vol. 139, no. 27, pp. 9203–9212. https://doi.org/10.1021/jacs.7b02716
8. Koshla, O., Lopatniuk, M., Rokytskyy, I., Yushchuk, O., Dacyuk, Y., Fedorenko, V., Luzhetskyy, A., and Ostash B., Properties of Streptomyces albus J1074 mutant deficient in tRNALeu UAA gene bldA, Arch. Microbiol., 2017, vol. 199, no. 8, pp. 1175–1183. https://doi.org/10.1007/s00203-017-1389-7
9. Bilyk, B. and Luzhetskyy, A., Unusual site-specific DNA integration into the highly active pseudo-attB of the Streptomyces albus J1074 genome, Appl. Microbiol. Biotechnol., 2014, vol. 98, no. 11, pp. 5095–5104. https://doi.org/10.1007/s00253-014-5605-y
10. Ishizuka, H., Horinouchi, S., Kieser, H.M., Hopwood, D.A., and Beppu, T., A putative two-component regulatory system involved in secondary metabolism in Streptomyces spp., J. Bacteriol., 1992, vol. 174, no. 23, pp. 7585–7594. https://doi.org/10.1128/jb.174.23.7585-7594.1992
11. Wittchen, M., Busche, T., Gaspar, A.H., Lee, J.H., Ton-That, H., Kalinowski, J., and Tauch A., Transcriptome sequencing of the human pathogen Corynebacterium diphtheriae NCTC 13129 provides detailed insights into its transcriptional landscape and into DtxR-mediated transcriptional regulation, BMC Genomics, 2018, vol. 19, no. 1, pp. 82–92. https://doi.org/10.1186/s12864-018-4481-8
12. Pfeifer-Sancar, K., Mentz, A., Rückert, C., and Kalinowski, J., Comprehensive analysis of the Corynebacterium glutamicum transcriptome using an improved RNAseq technique, BMC Genomics, 2013, vol. 14, pp. 888–899. https://doi.org/10.1186/1471-2164-14-888
13. Lopatniuk, M., Myronovskyi, M., and Luzhetskyy, A., Streptomyces albus: a new cell factory for non-canonical amino acids incorporation into ribosomally synthesized natural products, ACS Chem. Biol., 2017, vol. 12, no. 9, pp. 2362–2370.
14. Kallifidas, D., Jiang, G., Ding, Y., and Luesch, H., Rational engineering of Streptomyces albus J1074 for the overexpression of secondary metabolite gene clusters, Microb. Cell Fact., 2018, vol. 17, no. 1, pp. 25–37. https://doi.org/10.1021/acschembio.7b00359
15. Horbal, L. and Luzhetskyy, A., Dual control system – a novel scaffolding architecture of an inducible regulatory device for the precise regulation of gene expression, Metab. Eng., 2016, vol. 37, pp. 11–23. https://doi.org/10.1016/j.ymben.2016.03.008
16. Landwehr, W., Wolf, C., and Wink, J., Actinobacteria and myxobacteria—two of the most important bacterial resources for novel antibiotics, Curr. Top. Microbiol. Immunol., 2016, vol. 398, pp. 273–302. https://doi.org/10.1007/82_2016_503
17. Urem, M., Świątek-Połatyńska, M.A., Rigali, S., and van Wezel, G.P., Intertwining nutrient-sensory networks and the control of antibiotic production in Streptomyces, Mol. Microbiol. 2016, vol. 102, no. 2, pp. 183–195. https://doi.org/10.1111/mmi.13464
18. Braña, A.F., Rodríguez, M., Pahari, P., Rohr, J., García, L.A., and Blanco, G., Activation and silencing of secondary metabolites in Streptomyces albus and Streptomyces lividans after transformation with cosmids containing the thienamycin gene cluster from Streptomyces cattleya, Arch. Microbiol., 2014, vol. 196, no. 5, pp. 345–355. https://doi.org/10.1007/s00203-014-0977-z